(1)培养环境导致污染:如果在卫生不达标的环境中培养,那么细胞很容易受到污染最终凋亡,内在环境如培养箱水盘和水浴锅,检查是否进行了消杀。
(2)操作步骤导致污染:
a. 复苏:要用37℃的水没过冻存管瓶盖,轻轻摇动瓶子使其均匀溶解,切勿触碰吸管尖头部或容器瓶口,否则极容易造成污染;
b. 传代:瓶盖的盖口要朝下放置,否则容易染上细菌;其次在传代实验过程中赤膊进入超净台,并且操作前要用75%的酒精棉擦洗双手和前臂,才能进入实验;
c. 冻存:操作前务必要用75%的酒精擦拭无菌操作台面,确保整个实验过程处于一个无菌的状态。
(3)耗材问题导致污染:
出现此类情况可以用电离辐照灭菌:辐照灭菌是利用电离辐射产生的电磁波杀死大多数物质上的微生物的一种有效方法,用于灭菌的射线有:电子束、X射线、γ射线等。
我们可以将培养试剂及辅助试剂等条件不变,用新的耗材(培养皿或培养瓶、枪头)培养细胞,再观察细胞是否有污染问题